重组羧肽酶B RCPB01

CAS：9025-24-5  EC：3.4.17.2

无动物源性，无杂酶污染

【重组羧肽酶B｜产品简介】

酶切位点：羧肽酶B专一水解蛋白质C-末端碱性氨基酸（赖氨酸(Lysine、K)、精氨酸(Arginine、R)、组氨酸(Histidine

、H)）的氨基端；

氨基酸序列：雅心重组羧肽酶B是由重组大肠杆菌表达生产，氨基酸序列与大鼠胰腺羧肽酶B完全一致。

酶学性质：具有与动物源性羧肽酶B相同的酶学性质，可替代动物源性羧肽酶B用于各种生物技术过程中。

基本特性：又称为肽酰-L-赖氨酸（L-精氨酸）水解酶；精蛋白酶。分子量为33.8kD，等电点为6.0，最适pH为7.5-9.0。活性受精氨酸、赖氨酸的竞争性抑制，金属离子螯合剂如EDTA等抑制酶活。

【重组羧肽酶B｜产品特性】

备注：25℃，pH7.6，1min催化1μmol马脲酰-L-精氨酸水解的酶量为一个酶活单位。

【重组羧肽酶B｜使用方法】

用无菌水或者25mM Tris-HCl（pH 7.6）溶解重组羧肽酶B，使酶液浓度为1-10mg/ml；
酶量：目的蛋白（质量比）=1:50-1:1000，最适pH为7.5-9.0。

【重组羧肽酶B｜储存运输】

储存稳定性：重组羧肽酶B冻干粉存于2-8℃，24个月稳定；用无菌水或者25mM Tris-HCl （pH 7.6）溶解后存于-20℃，反复冻融10次，无活性损失。

运输稳定性：蓝冰保温运输，活性稳定。

【重组羧肽酶B｜产品优势】

无动物源性：重组生产，无外源性的病毒污染，生产过程不使用任何动物源原料。

质量稳定：批量生产，可保证稳定连续的批次生产；产品批次间无差异，质量稳定。

纯度高：比活高；宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。

冻干粉：易于储存和运输。

符合法规要求：生产设备和生产环境符合相关法规要求，生产过程完全遵循NSF ISO 9001:2015质量体系并符合GMP指导原则。

质量文件完整：按客户需求，可提供相关法规支持文件。

【重组羧肽酶B｜产品用途】

重组胰岛素的生产：重组羧肽酶B可用于重组胰岛素的生产，使用重组人胰岛素原表达法是仿照天然途径来合成胰岛素，主要分为基因工程菌的构建和后期使用胰蛋白酶与羧肽酶B进行酶切，羧肽酶B是一种丝氨酸蛋白酶，专一水解蛋白质C-末端碱性氨基酸（赖氨酸(Lysine、K)、精氨酸(Arginine、R)、组氨酸(Histidine、H)）的氨基端，在该过程中将胰岛素原中的B链C末端的一个精氨酸残基切割掉。

蛋白质C-末端氨基酸的测定 ：可用羧肽酶水解法（羧肽酶水解法是使用羧肽酶使多肽链的C-端逐个的水解，根据不同的反应时间测出酶水解所释放出的氨基酸种类和数量，从而知道蛋白质的C-末端残基顺序）测定蛋白质C-末端的序列，根据酶解的专一性不同，可区分为羧肽酶A、B、C和Y四种羧肽酶，A和B来自胰脏，羧肽酶A能水解除Pro、Arg和Lys以外的所有C-末端氨基酸残基，羧肽酶B只能水解Arg、Lys为C-末端残基的肽键；羧肽酶A和B的混合物能释放除Pro以外的任一C-末端残基。C来自柑桔叶；Y来自面包酵母。根据释放的氨基酸量（摩尔量）与反应时间的关系，便可以知道该肽链的C-末端氨基酸序列。这是理想的情况，实际上应用时有不少困难，例如当几个氨基酸以相临的速度释放或两个以上相邻的氨基酸相毗邻时，结果必须小心解释。

重组抗体的质量检测；蛋白质C-末端组氨酸标签的去除；其它重组多肽类物质的生产；某些特殊化合物的酶促合成。
 

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